Kit PCR Masa Nyata Virus Monkeypox

Penerangan Ringkas:

Kucing.Tidak	B001P-01	Saiz	48 Ujian/Kit
spesimen	Serum/ Lesion Exudate	Trans.& Sto.Temp.	-25～-15℃
Format	Premix telah diliofilkan dan diasingkan dalam 8 tiub PCR jalur
Instrumen Berkenaan	Instrumen PCR masa nyata seperti ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio dan BTK-8

Hantar e-mel kepada kami

Butiran Produk

Tag Produk

Maklumat produk

Digunakan

Ia digunakan untuk pengesanan Virus Monkeypox dalam serum manusia atau sampel eksudat lesi dengan menggunakan sistem PCR masa nyata.

Prinsip Ujian

Produk ini ialah sistem ujian PCR masa nyata Taqman® berasaskan probe pendarfluor.Primer dan probe khusus direka untuk pengesanan gen F3L Virus Monkeypox.Kawalan dalaman yang menyasarkan gen pemuliharaan manusia memantau pengumpulan sampel, pengendalian sampel dan proses PCR masa nyata untuk mengelakkan keputusan negatif palsu.Kit ini adalah sistem lyophilized pracampuran sepenuhnya, yang merangkumi bahan yang diperlukan untuk pengesanan Virus Monkeypox: enzim penguatan asid nukleik, enzim UDG, penimbal tindak balas, primer dan probe khusus.

Kandungan Utama

Komponen yang disediakan disenaraikan dalam jadual.

Komponen	Pakej	Bahan
Virus MonkeypoxPremix Liofil	8 tiub PCR jalur× 6 kantung	Primer, probe, dNTP/dUTP Mix, Mg2+, Taq DNA polymerase, UDG Enzyme
Kawalan Positif MPV	400 μL × 1 tiub	Urutan DNA yang mengandungi gen Sasaran
Kawalan Negatif MPV	400 μL × 1 tiub	Urutan DNA yang mengandungi segmen gen manusia
Melarutkan Penyelesaian	1 mL × 1 tiub	Penstabil
Sijil Pematuhan	1 keping	/

Aliran Operasi

1. SampelKoleksi:Spesimen hendaklah dikumpulkan ke dalam tiub steril mengikut

dengan spesifikasi teknikal standard.

2. Penyediaan Reagen (Kawasan Penyediaan Reagen)

Keluarkan komponen kit, imbangkannya pada suhu bilik untuk kegunaan siap sedia.

3. Pemprosesan Spesimen (Kawasan Pemprosesan Spesimen)

3.1 Pengekstrakan asid nukleik

Adalah disyorkan untuk mengambil sampel cecair 200μL, Kawalan Positif dan Kawalan Negatif untuk pengekstrakan asid nukleik, mengikut keperluan dan prosedur yang sepadan bagi kit pengekstrakan DNA virus.

3.2 Pelarutan serbuk terliofil dan penambahan templat

Sediakan Premix Liofilisasi Virus Monkeypox mengikut bilangan sampel.Satu sampel memerlukan satu tiub PCR yang mengandungi serbuk pracampuran Lyophilized.Kawalan negatif & kawalan positif harus dianggap sebagai dua sampel.

(1) Tambah 15μL Penyelesaian Melarutkan ke dalam setiap tiub PCR yang mengandungi pracampuran Liofil, kemudian tambahkan 5μL sampel yang diekstrak/ Kawalan Negatif/Kawalan Positif ke dalam setiap tiub PCR masing-masing.

(2) Tutup tiub PCR dengan ketat, kuis tiub PCR dengan tangan sehingga serbuk lyophilized benar-benar larut dan sebati, kumpulkan cecair ke bahagian bawah tiub PCR dengan sentrifugasi berkelajuan rendah serta-merta.

(3) Jika menggunakan instrumen PCR Masa Nyata biasa untuk pengesanan, maka teruskan pindahkan tiub PCR ke kawasan amplifikasi;jika menggunakan BTK-8 untuk pengesanan, maka perlu melakukan operasi berikut: pindahkan 10 μL cecair dari tiub PCR ke telaga cip tindak balas BTK-8.Satu tiub PCR sepadan dengan satu telaga pada cip.Semasa operasi paip, pastikan pipet adalah menegak 90 darjah.Hujung pipet penghalang aerosol hendaklah diletakkan di tengah telaga dengan daya sederhana dan berhenti menolak pipet apabila ia mencapai gear pertama (untuk mengelakkan buih).Selepas telaga diisi, keluarkan membran cip tindak balas untuk menutup semua telaga dan cip kemudian dipindahkan ke kawasan pengesanan amplifikasi.

4. Penguatan PCR (Kawasan Pengesanan)

4.1 Masukkan tiub PCR/cip tindak balas ke dalam tangki tindak balas dan tetapkan nama setiap tindak balas dengan baik dalam susunan yang sepadan.

4.2 Tetapan pendarfluor pengesanan: (1) Virus Monkeypox (FAM);(2) Kawalan Dalaman (CY5).

4.3 Jalankan protokol berbasikal berikut

Protokol ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

Langkah-langkah		Suhu	Masa	Kitaran
1	Pra-denaturasi	95 ℃	2 min	1
2	Denaturasi	95 ℃	10 s	45
2	Penyepuhlindapan, lanjutan, pemerolehan pendarfluor	60 ℃	30 s	45

Protokol BTK-8:

Langkah-langkah		Suhu	Masa	Kitaran
1	Pra-denaturasi	95 ℃	2 min	1
2	Denaturasi	95 ℃	5 s	45
2	Penyepuhlindapan, lanjutan, pemerolehan pendarfluor	60 ℃	14 s	45

5. Analisis keputusan (sila rujuk Manual Pengguna Instrumen）

Selepas tindak balas, keputusan akan disimpan secara automatik.Klik "Analisis" untuk menganalisis dan instrumen akan mentafsir nilai Ct secara automatik bagi setiap sampel dalam lajur hasil.Keputusan kawalan negatif dan positif hendaklah mematuhi "6. Kawalan Kualiti" berikut.

6. Kawalan kualiti

6.1 Kawalan Negatif: Tiada Ct atau Ct>40 dalam saluran FAM, Ct≤40 dalam saluran CY5 dengan lengkung amplifikasi biasa.

6.2 Kawalan Positif: Ct≤35 dalam saluran FAM dengan lengkung amplifikasi biasa, Ct≤40 dalam saluran CY5 dengan lengkung amplifikasi biasa.

6.3 Keputusan adalah sah jika semua kriteria di atas dipenuhi.Jika tidak, hasilnya tidak sah.

Tafsiran Hasil

Keputusan berikut adalah mungkin:

	Nilai Ct saluran FAM	Nilai Ct saluran CY5	Tafsiran
1#	Tiada Ct atau Ct>40	≤40	Virus monkeypox negatif
2#	≤40	Sebarang keputusan	Virus monkeypox positif
3#	40～45	≤40	Ujian semula;jika masih 40~45, laporkan sebagai 1#
4#	Tiada Ct atau Ct>40	Tiada Ct atau Ct>40	Tidak sah

CATATAN: Jika keputusan tidak sah berlaku, sampel perlu dikumpul dan diuji semula.

Maklumat Pesanan

Nama Produk	Kucing.Tidak	Saiz	spesimen	Jangka hayat	Trans.& Sto.Temp.
Kit PCR Masa Nyata Virus Monkeypox	B001P-01	48 ujian/kit	Serum/ Lesion Exudate	12 bulan	-25～-15℃